人软骨肉瘤细胞 （SW-1353）

人软骨肉瘤细胞 (SW-1353)
细胞介绍：
SW-1353细胞源于1977年一个72岁白【bái】人【rén】，患者诊【zhěn】断为原【yuán】发性二级【jí】软骨肉瘤。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度【dù】：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅【xùn】速放【fàng】入37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】（水面要低于【yú】冻存管盖部）摇晃解【jiě】冻【dòng】，移入事先准备好的含【hán】有【yǒu】4mL培养基【jī】的15ml离心管中【zhōng】混【hún】合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然【rán】后将所【suǒ】有细胞悬液移入【rù】含有5ml培养基【jī】的培养瓶中培养过夜。第二【èr】天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人软骨肉瘤细胞 (SW-1353)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养【yǎng】上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次【cì】。力【lì】口2m丨【shù】消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于【yú】37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观【guān】察【chá】细胞消【xiāo】化【huà】情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿【ná】回操【cāo】作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加入3ml此细【xì】胞的培养基终止消化。轻轻吹打后吸出，移入【rù】15ml离管中，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃【qì】去【qù】上清【qīng】液，加入lmL培【péi】养液后吹匀。移入到【dào】事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养【yǎng】瓶【píng】中或含有14ml培养基【jī】的T-75培养瓶【píng】中培养。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞【bāo】生长状态【tài】良【liáng】好时【shí】，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化【huà】处理并进行细胞计数。消化方法按照【zhào】细胞传【chuán】代【dài】方法的9-21步骤进行，后的重悬液【yè】使用血清【qīng】。悬【xuán】浮细【xì】胞直接计数【shù】后离心【xīn】，用血清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度【dù】为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管中。本公司【sī】按【àn】每【měi】个冻存管【guǎn】细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干【gàn】冰【bīng】己【jǐ】挥发干【gàn】净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有污染， 请立即与我【wǒ】们电【diàn】联。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜在的生物危害性，必【bì】须【xū】在二级生物安【ān】全台内操作， 并请【qǐng】注【zhù】意防【fáng】护，所有废【fèi】液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器皿需要【yào】灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：软骨肉瘤
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人软骨肉瘤细胞 (SW-1353)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜【jìng】下确认细【xì】胞生长状态，去掉封口膜【mó】并将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满（90%以上【shàng】）请及时【shí】进【jìn】行【háng】细胞【bāo】传代，传代培养用6ml本【běn】公司附带的【de】*培养基。
5.接到【dào】细【xì】胞次日，请检查细【xì】胞是否污【wū】染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得【dé】电联。
细胞用途：仅供使用。