人膀胱移行细胞癌细胞 （T24）

人膀胱移行细胞癌细胞 (T24)
细胞介绍：
该细胞【bāo】源自病人的转移性细胞腺癌，对T24和【hé】相关细胞株有细胞【bāo】毒性，代【dài】时【shí】为19小时，含ras (H-ras)癌基因【yīn】。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八【bā】, D-葡萄糖2.5g八，丙【bǐng】酮酸【suān】钠O.llg八【bā】)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度【dù】：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细【xì】胞悬液的冻存【cún】管在【zài】37°C水【shuǐ】浴【yù】中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞【bāo】悬液加【jiā】入【rù】培【péi】养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过【guò】夜）。第【dì】二【èr】天【tiān】换液【yè】并检查细【xì】胞密度【dù】。
 
人膀胱移行细胞癌细胞 (T24)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进【jìn】行传代【dài】培【péi】养。弃去培养上清，用不含【hán】钙、镁离【lí】子的【de】PBS润洗细胞9-21次【cì】。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中【zhōng】消【xiāo】化9-21分【fèn】钟，然后在显微镜下观察细【xì】胞消【xiāo】化情况，若细胞大部 分【fèn】变圆【yuán】并脱【tuō】落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲几【jǐ】下培养瓶【píng】后加【jiā】少量培【péi】养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基【jī】，轻轻打【dǎ】匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养液【yè】后吹匀。将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比例分到【dào】新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良【liáng】好【hǎo】时，可进【jìn】行细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存时，弃去培养基后【hòu】加入少【shǎo】量【liàng】胰酶，细【xì】胞变圆脱落后，加入约lml含【hán】血清【qīng】的【de】培养基后 加入冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行【háng】冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己挥发干净【jìng】、冻【dòng】存管瓶盖脱【tuō】落、破【pò】损及细【xì】胞有污染，请立【lì】即与我们电联。
所有动物细胞均视【shì】为【wéi】有潜在的【de】生物危害性，必【bì】须在【zài】二级生物安全台【tái】内操作，并【bìng】请注【zhù】意防【fáng】护，所有废液【yè】及接触过此细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：膀胱；移行细胞癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T75瓶或者lmL冻存管包装
 
人膀胱移行细胞癌细胞 (T24)运【yùn】输和保存：可【kě】选择干冰运输及发送复苏存【cún】活【huó】细胞方式：（1)干冰【bīng】运输【shū】，收到后立即【jí】转【zhuǎn】入液氮冻存或直接复苏；（2)存活细胞【bāo】，收到后应继【jì】续生长，传【chuán】代【dài】达到细胞生长状态良【liáng】好时【shí】，再进行【háng】冻存。具体操作见细胞【bāo】培养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。